杭州环特生物科技股份有限公司

我们评价斑马鱼行为毒性有4个指标：1.行为学；2.中枢神经凋亡细胞荧光信号强度；3. 外周运动神经长度；4. 脑变性发生率。

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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼有明显的肾性水肿和肾小球滤过率明显下降，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验说明该供试品对斑马鱼有肾脏毒性。

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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼细胞核出现明显拖尾，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有基因毒性。

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，免疫调节剂组巨噬细胞数量与正常对照组相似，并未出现模型对照组免疫力低下的情况。2.本实验证实了盐酸小檗胺具有增强免疫力的功效。

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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射黄斑变性药物组与模型对照组比较，视网膜血管明显变细、视网膜结构较正常、hif-1α基因表达下调。2.本实验证实了施图伦滴眼液、贝伐单抗具有明显的湿性黄

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用皮肤弹性产品组的col1a2基因、col1a1a和col1a1b基因相对表达量较正常对照组明显增加。

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以谷胱甘肽为代表的周围神经保护剂组的运动神经元轴突长度与模型对照组相比明显增加，证实了谷胱甘肽的周围神经保护功效。

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服用一段时间眼保护剂后，我们对斑马鱼整体做凋亡细胞特异性染色，观察细胞凋亡，同时制作成病理切片观察眼部的病理结构变化。

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服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼整体进行观察评价，观察斑马鱼心脏、脑部、耳、下颌、眼、肝脏、肠道、躯干/尾/脊索、肌肉/体节、鳍、体长、身体着色、循环系统、身体水肿和出血等毒性反应情况，统计毒性

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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用Wnt信号通路抑制剂的体轴长度和尾鳍再生面积均小于正常对照组。2.本实验证实了LGK974具有体轴发育和组织再生抑制作用，作用机制与抑制wnt信号通路相关。

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